本發(fā)明涉及一種檢測溶液中MMP9蛋白的方法,該方法包括以下步驟:⑴設(shè)計(jì)MMP9特異性小分子配體;⑵小分子配體的化學(xué)合成:①制備KF-CaF2熔融物:②制備對甲基苯磺酰氟;③采用催化劑LDA進(jìn)行反應(yīng)得化合物Ⅰ;④HCL氣體脫去反應(yīng)物上Boc基團(tuán),得化合物Ⅱ;⑤采用催化劑三乙胺進(jìn)行反應(yīng)得化合物Ⅲ;⑥化合物Ⅱ與化合物Ⅲ反應(yīng)得化合物Ⅳ;⑦化合物Ⅳ與NaOH溶液進(jìn)行反應(yīng)得化合物Ⅴ;⑧采用催化劑為O-(四氫-2H-吡喃-2-基)羥基胺、NMM、HOBT和EDC進(jìn)行反應(yīng)得化合物Ⅵ;⑨化合物Ⅵ脫去保護(hù)基團(tuán)得MMP9小分子配體;⑶SPR法檢測溶液中的MMP9:ⅰ裸金膜
芯片的修飾;ⅱ小分子配體的固定;ⅲ非特異性小分子吸附的排除;ⅳ檢測溶液中的MMP9蛋白;ⅴMMP9非特異性蛋白吸附的排除。本發(fā)明方法靈敏度高。
聲明:
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