本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域,具體為一種紅豆杉愈傷轉(zhuǎn)化過程中農(nóng)桿菌侵染的方法。本發(fā)明把紅豆杉下胚軸作為外植體誘導(dǎo)愈傷組織,并經(jīng)過培養(yǎng)獲得胚性愈傷;用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo),采用農(nóng)桿菌浸潤的刀片切割紅豆杉愈傷組織,將帶有GUS基因的pCAMBIA1304質(zhì)粒導(dǎo)入紅豆杉愈傷組織,PCR檢測外源潮霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因(HPT)的整合情況,組織化學(xué)方法檢測GUS基因在組織中的表達(dá)情況,獲得紅豆杉的轉(zhuǎn)基因愈傷組織;其中,刀面接觸在愈傷組織的切面上形成一定的菌液梯度,從而覆蓋轉(zhuǎn)化所需的最佳菌液濃度,確保細(xì)胞得到成功轉(zhuǎn)化,提高農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的成功率,為紅豆杉愈傷組織開展高效地遺傳轉(zhuǎn)化工程奠定的基礎(chǔ)。
聲明:
“紅豆杉愈傷轉(zhuǎn)化過程中農(nóng)桿菌侵染的方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)