本發(fā)明公開了一種熒光探針及其制備方法與應(yīng)用,其結(jié)構(gòu)式如下式Ⅰ所示:熒光探針的制備方法,包括如下步驟:將對硝基苯甲醛,2, 5-二甲基吡嗪和催化劑混合得到混合液,將混合液加熱至150-180℃,反應(yīng),得到PY-NO2;在PY-NO2中加入多硫化鈉,反應(yīng),得到PY-NH2;將PY-NH2、咖啡酸、三乙胺、HOBT和EDC.HCL加入到二氯甲烷和DMF的混合溶劑中得到混合液;所述混合液在惰性氣體的保護(hù)下,攪拌,得到雙光子熒光探針的粗產(chǎn)品,純化后,得到雙光子熒光探針純品。本發(fā)明的熒光探針的化學(xué)穩(wěn)定性,光物理穩(wěn)定性好;在酸性、中性和堿性中對O2˙-都能響應(yīng)敏感,測定靈敏度較高,且響應(yīng)時(shí)間極短。
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