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       > L-半胱氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白突變體及其在生產(chǎn)L半胱氨酸中的應(yīng)用
      
		
      
	
      

	
      
		
      
			
      
				
      
					
      L-半胱氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白突變體及其在生產(chǎn)L半胱氨酸中的應(yīng)用
      
					
      
					     912  
					    編輯：管理員  
						來源：中冶有色技術(shù)網(wǎng)  
						
      
							2023-03-19 08:57:04						
      
					
      
				
      
				
      
				    本發(fā)明涉及一種L?半胱氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白突變體制備方法，其方法步驟包括：⑴A31V突變體的獲得，以SEQIDNO.2核苷酸序列為模板，SEQIDNO.3、SEQIDNO.4為引物，進(jìn)行PCR得到的突變體基因eamBA31V；⑵將突變體基因eamBA31V與PMW118質(zhì)粒分別用EcorI,XbaI雙酶切，酶切產(chǎn)物純化后用T4連接酶22℃連接12小時，連接產(chǎn)物用化學(xué)轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài)細(xì)胞，涂布于含氨芐氯霉素的LB固體平板上，37℃過夜培養(yǎng)；⑶對固體培養(yǎng)基上長出的單菌落用PMW118通用引物M13F、M13R進(jìn)行菌落PCR，將PCR產(chǎn)物測序，驗(yàn)證正確的單菌落擴(kuò)大培養(yǎng)，提取質(zhì)粒PMW118?eamB?A31V。本發(fā)明同時將L?半胱氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白突變體應(yīng)用于產(chǎn)L?半胱氨酸大腸桿菌工程菌株，可使大腸桿菌對L?半胱氨酸耐受性提高1.78倍，L?半胱氨酸產(chǎn)量提高18％。				    
      
				        
      聲明：
      
				        
      
				         “L-半胱氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白突變體及其在生產(chǎn)L半胱氨酸中的應(yīng)用” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究，如用于商業(yè)用途，請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
				        
      
				        
      
				        我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)
				        
      
				    
      
				
      
				
				
      
					
      
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      標(biāo)簽：
      
					 
					化學(xué)分析
									
      
				
				
				
				
								
								
				
				
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