本發(fā)明公開了一種新型的低起始量DNA甲基化建庫方法。本發(fā)明提供了一種制備甲基化測序文庫的方法,依次包括如下步驟:(1)取基因組DNA,進行氧化脫氨處理;(2)進行全基因組擴增;(3)構(gòu)建測序文庫。步驟(1)中,采用酶化學(xué)法進行所述氧化脫氨處理,采用采用雙加氧酶(TET2)進行氧化處理,采用胞嘧啶脫氨酶(APOBEC)進行脫氨處理。全基因組擴增的目的為將ng級別的DNA轉(zhuǎn)換為μg級別的DNA。本發(fā)明提供的方法具有如下有益效果:可以做到極低起始量的基因組DNA甲基化處理,起始量可低至單細胞級別;操作步驟簡單;對DNA的損傷最小;改善了現(xiàn)有微量甲基化建庫的GC堿基分布不均衡,覆蓋度低,duplication rate高等現(xiàn)象。
聲明:
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